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化學發光檢測技術用途廣,具有非常高的靈敏度
瀏覽次數:171發布日期:2020-01-13
 
  
  化學發光分析技術是現代微量分析方法之一,由於其靈敏度高(可達10-18mol)、簡便快速(計數1秒/管)、線性好(可兩點校準標準曲線)、有效期長(可達1年)、安全無害(無放射性和致畸物汙染)等優點而成為取代放免和酶聯的重要技術。
  
  辣根過氧化酶使試劑中的發光物(luminol)氧化並發光,而試劑中含有增強劑這使得發光增強了1000倍。在免疫印跡中,將複雜的蛋白混合物經sds-page分離,並轉移到固相膜上(如nc、pvdf)等,用於免疫學檢測,經HRP標記的抗體與膜上的蛋白直接(標記一抗)或間接(標記二抗)反應。
  
  在如今的Westernblot實驗中,化學發光檢測是常用的檢測方法。相對於顯色檢測和熒光檢測而言,它的靈敏度非常高,可達到飛克級(fg)。自從增強型化學發光(ECL)檢測問世以來,這種方法就受到了全世界科研工作者的喜愛。
  
  化學發光檢測通常使用的是辣根過氧化物酶(HRP)。它催化底物魯米諾(luminol)的氧化,同時生成光信號。這些信號可通過X光膠片的曝光來檢測,或直接在與化學發光兼容的CCD成像係統上獲取圖像。當然,後一種方式更方便,也更流行。
  
  用途:
  
  該底物試劑與堿性磷酸酶(ALP)混合後,堿性磷酸酶磷酸根水解後,底物立即發生分解反應釋放出光子,在特定的堿性磷酸酶濃度範圍內,釋放的光子數量與溶液中堿性磷酸酶的濃度成正比,所以可以用於堿性磷酸酶的定量檢測。
  
  應用領域:
  
  1堿性磷酸酶發光檢測;
  
  2.ELISA化學發光檢測;
  
  3.WB化學發光檢測;
  
  4.其他酶聯化學發光反應檢測。
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